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凍存管在使用前需注意哪些問題?

更新時間:2022-09-06    點擊次數(shù):2967

  凍存管在使用前需注意哪些問題?

 

  1、問:Nunc凍存管可以滅菌嗎?

  答:雖然凍存管使用聚乙烯材料制造,但是我們不推薦客戶滅菌。

  2、問:凍存管內(nèi)旋蓋和外旋蓋有什么區(qū)別?

  答:內(nèi)旋凍存管為氣相液氮氣相中凍存樣品而設(shè)計,管口硅膠墊增強了凍存管的密封性;外旋凍存管為機械設(shè)備如冰箱中凍存樣品而設(shè)計,外旋蓋的螺紋蓋可以降低處理樣品時的污染幾率。

  3、問:Nunc的凍存管可以浸入液氮(液相)中凍存樣品嗎?

  答:Nunc的內(nèi)旋凍存管可以在液氮中儲存,由于硅膠墊增強密封性。但超低溫度下,任何的密封材料都變得異常脆弱,理論上只要是機械密封就存在泄漏的危險,為了防止泄漏產(chǎn)品的危險,機械密封的凍存管必須密封在保護袋中。Nunc提供CryoFlex 密封管,熱密封的聚乙烯管專門為Nunc凍存管密封設(shè)計。將凍存管在液氮液相中凍存而沒有使用CryoFlex 密封管是十分危險的,凍存管在液氮液相中凍存必須使用CryoFlex 密封管進行熱密封。

  警告:不要使用Nunc的凍存管在液氮液相凍存樣品,除非正確的將凍存管密封在Nunc CryoFlex Tubing (Cat. No. 343958)中。若不正確使用凍存管,液氮會進入凍存管中導致壓力上升,發(fā)生爆炸或者生物泄漏安全事故。正確使用方法可以參考Nalge Nunc International Cryopreservation Manual。

  4、問:當凍存管儲存在液氮液相中而沒有使用CryoFlex Tubing 時,如何正確的溶解復蘇細胞?

  答:在整個操作過程中必須穿戴保護服,包括手套,臉罩等。

  凍存管從液氮液相取出后必須在液氮氣相中儲存24h,這樣可以使得液氮從凍存管中慢慢的蒸發(fā)和逃逸,從而降低凍存管中的壓力。等在液氮氣相儲存24h后,將凍存管放入水浴槽,同時用毛巾覆蓋,等熔融復蘇結(jié)束后轉(zhuǎn)移凍存物。

  5、問:使用CryoFlex 密封管時需要熱密封,這會不會影響細胞活性?

  答:將樣品加入凍存管以前需要將凍存管置于4℃ 冰浴槽。熱密封CryoFlex 密封管時,凍存管內(nèi)溫度的升高水平不足以破壞細胞活性。這個階段需要加入凍存保護劑。

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