本生試劑盒—有關(guān)試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線做不好有哪些原因原因

　　試劑盒被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定，但測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果，引起測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：

　　(1)試劑盒因素

　　(2)標(biāo)本因素

　　(3)操作因素

　　試劑盒需要注意的事項(xiàng)是：

　　1. 在做完整的實(shí)驗(yàn)過(guò)儀器之前，儀器預(yù)熱半小時(shí)，這個(gè)計(jì)算好時(shí)間，也可以直接將儀器一直開著，直到整個(gè)實(shí)驗(yàn)結(jié)束。

　　2. 在加液過(guò)程中不要使槍頭觸及到板子底部，一般槍頭都懸空，可以將槍頭靠在孔邊緣，

　　3. 但槍頭尖懸空，如果槍頭上殘留液體看整體多少量，不要吹打下去，特別忌諱在版孔內(nèi)壁流向版孔，整個(gè)加液過(guò)程不要產(chǎn)生氣泡(洗滌液除外)。

　　試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線做不好的原因分析：

　　A、剛加完顯色劑時(shí)梯度明顯，顯色液可能是從高濃度向低濃度孔加的。

　　B、酶濃度太高，導(dǎo)致zui后顯色結(jié)果都是高的。

　　C、包被：酶標(biāo)系統(tǒng)不匹配或者酶標(biāo)的非特異反應(yīng)太強(qiáng)，或者酶標(biāo)儀讀數(shù)范圍不夠。

　　D、樣本中有能夠催化底物的物質(zhì)，沒(méi)洗下來(lái)。

　　建議：包被、酶標(biāo)重新做梯度，先用較低的濃度把梯度摸索好，然后再優(yōu)化靈敏度，zui后調(diào)出所需的靈敏度、線性范圍。

　　建議：有條件的話，可以把酶免的蛋白系統(tǒng)移植到板式化學(xué)發(fā)光上，加完底物三分鐘讀數(shù)。

　　建議：蛋白系統(tǒng)靈敏度夠的話，顯色十分鐘就差不多了。

　　建議：酶是自己標(biāo)的這種情況的，HRP比例不要太高。

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